Последние новости

Реклама

В.В СКЛЯРЕВИЧ. Антибактериальные лекарственые средства. Методы стандартизации препаратов. Раздел 3

В.В СКЛЯРЕВИЧ. Антибактериальные лекарственые средства. Методы стандартизации препаратов. Страница 308

При определении концентрации антибиотика в сыворотке, как правило, используют двухслойную среду (агар), которую предварительно разливают в стерильные чашки Петри диаметром 100 мм в объеме 20 мл (пропись сред приведена в табл. 8.2). Далее на хорошо застывшей поверхности агара делают 4 специальные лунки (~ 6 мм) в которые вносят 5 мкл стандартного раствора антибиотика и полученной сыворотки без разведения или после соответствующего разведения (если предполагаемая концентрация антибиотика в крови может превысить контрольную) донорской сывороткой или буферным раствором. Чашки инкубируют 18-24 ч в термостате при температуре 37 °С.

При определении концентрации антибиотика в тканях чаще используют однослойный питательный агар, который также предварительно разливают в стерильные чашки Петри диаметром 100 мм в объеме 15 мл (пропись питательной среды приведена в табл. 8.2). На остывший агар наносят (стерильным фальконом) в трех направлениях под углом 60° иноку- люм, соответствующей тест-культуры. Далее на засеянную поверхность помещают 3 диска, пропитанные 10 мкл антибиотика в диапазоне концентраций стандартной кривой и вытяж- кой/надосадочной жидкостью образцов исследуемой ткани. Чашки инкубируют 18-24 ч в термостате при температуре 35 °С.

Расчет концентрации антибиотика в испытуемой пробе сыворотки крови или ткани проводят по стандартным кривым, которые строятся по результатам титрования стандартного раствора антибиотика. Для получения воспроизводимых результатов необходимо соблюдение строгой стандартизации опытов.

Кроме определения концентрации, для изучения фармако- кинетики различных ЛС оценивают процесс снижения концентрации препарата, который, как правило, описывается би- экспоненциальным или моноэкспоненциальным уравнением [5, 6].